摘要
 

　　建立了一套同時支持兩套溶出儀的全自動溶出、在線稀釋和檢測系統，重點研究了兩套溶出儀、雙取樣泵、雙補液系統、稀釋平臺、UV進樣系統和UV檢測工作時的時序調度，確保整套方案在符合藥典要求的情況下，各子系統之間不會發生沖突，并達到效率的目的。系統采用鹽酸氨溴索片進行驗證，在30mins內采樣5次，共60個樣品，并自動協調稀釋、進樣和檢測等過程，實驗表明，采用該時序調度的方案可確保實驗結果符合要求，并且在現有方法上將效率提高了100%以上。
 

　　正文
 

　　隨著仿制藥一致性評價等工作的開展，各相關藥品檢測單位和制藥企業的儀器及設備配套有必要進一步完善。為此，特建立了一套同時全自動雙溶出、在線稀釋和檢測系統。與市場上現有的自動溶出儀相比，該系統不僅能完成前者具備的溶出、采樣和補液工作，還具備自動稀釋、UV進樣、UV檢測以及數據分析等功能。此外，為滿足一致性評價和客戶批量處理樣品的需求，系統還同時接入了兩套溶出儀。
 

　　系統采用鹽酸氨溴索(ambroxolhydrochloride，1)片的溶出度試驗進行驗證。1為溴己新的活性代謝產物，主要用于急慢性支氣管炎、哮喘性支氣管炎、支氣管擴張、肺結核等引起的咳痰困難及手術前后咳痰困難[1]。由于1屬速溶型藥物，溶出曲線的取樣時間點設計為5、10、15、20及30min，為使最終數據具統計學意義(n≥10)，每批次試驗樣品數量設計為12片，該工作具有采樣時間間隔短、樣品數量多且勞動強度大的特點，可用以充分驗證系統在復雜條件下的工作狀況。
 

　　1方案概況
 

　　全自動雙溶出在線稀釋和檢測系統是指能同時支持兩套溶出儀，并且可以自動完成溶出、取樣、補液、稀釋、UV進樣、讀數、數據分析和打印報告等溶出全過程的溶出系統，
 

　　2雙溶出系統時序研究
 

　　由于雙溶出系統同時支持兩套溶出儀、兩臺采樣泵、兩套補液系統、稀釋平臺、進樣子系統和UV檢測器等多個儀器，這些儀器可能來源于不同廠家，所以其系統架構和工作模式非常復雜，尤其是如何協調各儀器和子系統之間的工作流程。本文針對該系統進行了時序研究。
 

　　2.1時序設計原則
 

　　考慮到溶出試驗的要求和系統架構，在設計時序時的首要考慮是符合藥典要求，具體原則如下。
 

　　①溫度控制：很多溶出儀只有一個溫度計測量水浴溫度，無法測量各個溶出杯中的實際溫度，因此系統收到的反饋溫度有可能不是溶出杯中的實際溫度，在計算時序時必須預留足夠的升溫時間。對于可以檢測到每個杯內溫度的溶出儀，可忽略此升溫時間。
 

　　②優先采樣：對溶出度/釋放度試驗而言，采樣時間是影響結果的關鍵指標之一。因此在雙溶出系統的工作時序中，采樣具備優先級，即無論系統在干什么，只要到了采樣時間，系統就必須優先完成采樣。
 

　　③提高效率：對整個溶出過程而言，如果每個樣品都是按部就班地進行溶出→采樣→稀釋→進樣→讀數→數據分析，效率太低，尤其是對于需要多點溶出的藥品。系統擁有合理的時間調度機制，使系統能夠見縫插針地利用各個時間片段，進行持續不斷的工作。
 

　　④清洗片段：為了確保空白品、標準品和各樣品之間沒有交叉污染，在處理每個不同空白品、標準品或樣品之間都添加了較小的時間片段，確保該時間片段內系統完成采樣針及液路的清洗。
 

　　⑤防止沖突：因為兩個溶出儀中12個樣品的采樣、稀釋和進樣3個過程都需要用到ASP2000的同一機械臂，因此必須計算時間提前量，并且設計緊急情況處理機制。
 

　　2.2時序調度流程
 

　　基于上述原則，本研究針對雙溶出系統設計了相應的時序調度流程(見圖2)，并通過軟件使之實現。具體說明如下：啟動系統后，系統1開始投片，間隔約3min系統2開始投片(階段一)。系統1采樣時間到達之前進行液路清洗，然后在系統1采樣時間點系統1完成采樣，隨后進行補液；同時，在系統2采樣時間點系統2完成采樣，隨后進行補液(階段二)。在下個采樣時間到來之前進行標準品的稀釋、空白品和標準品的UV進樣及檢測(階段三)。當采樣時間到來之前，系統將優先保證采樣工作，將空白品及標準品的工作(階段三)暫停，首先完成各系統的采樣工作(階段二)，完成后再進行之前懸掛的空白品及標準品的工作(階段三)。之后逐一稀釋樣品并UV進樣檢測。檢測完成后，自動進行數據分析并打印報告。
 

　　3驗證方法與結果
 

　　本試驗選取了1片進行系統驗證，試驗要求30mins內采樣5次，共60個樣品，稀釋并進樣檢測。
 

　　3.1儀器與試藥
 

　　本試驗采用英國實驗室自動化公司(ALS)提供的ASP2000型雙溶出在線稀釋及檢測方案進行驗證
 

　　對照品(中國食品藥品檢定研究院，純度100%，批號100599-200502)；1片(上海勃林格殷格翰藥業有限公司，規格30mg，批號084726)；試劑均為分析純，水為純化水。
 

　　3.2溶出度試驗方法
 

　　依照溶出度測定法(中國藥典2010年版二部附錄XC)中槳法，分別以水、0.1mol/L鹽酸、pH4.5乙酸緩沖液和pH6.8磷酸緩沖液900ml為溶出介質，轉速50r/min，分別于5、10、15、20和30min時各取溶液10ml并過濾，作為供試品溶液，即時回補相同體積的溶出介質。另取1對照品適量，加相應溶出介質溶解并稀釋，制成約33μg/ml的溶液，作為對照品溶液。取供試品溶液(稀釋2倍)和對照品溶液，參照UV法(中國藥典2010年版二部附錄IVA)，在244nm波長處測定吸光度D，計算每片在不同時間點的溶出量。
 

　　3.3樣品溶出結果
 

　　按“3.2”項下方法，在4種不同介質內對同一批次的12個樣品進行溶出度檢測，同時，還將在各介質中的樣品溶出度與手工操作(溶出儀自動取樣，人工完成樣品的稀釋及UV測定)數據進行對比(圖4)，結果基本一致。
 

　　3.4工作效率比較
 

　　比較了ASP2000系統和手工操作的耗時，人有效工作時間。該系統較手工方式相比效率大幅提高。工操作需時4min/個，該試驗共240個樣品，共耗時960min。而使用ASP2000系統該項工作*由系統自動完成，無需人工干預，無需消耗人工時間。ASP2000系統具有自動繪制溶出曲線及數據分析的功能，使用者還可省去數據分析的時間。此外，ASP2000系統還可利用夜間時間進行工作，增加了有效工作時間。該系統較手工方式相比效率大幅提高。
 

　　4討論
 

　　本研究采用1片的溶出度試驗驗證了全自動雙溶出在線稀釋及檢測系統的時序設計，結果表明本法精度、可靠性都較高，并且能大幅降低勞動強度，提高工作效率，適合于各種片劑和膠囊的釋放度研究。系統數據與手工試驗數據對比結果顯示，兩組數據具有一致性。